UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGIA PRACTICA Nº BF.5.09-10 Tema de la práctica: SINTOMATOLOGIA Y DIAGNOSTICO DE LAS INTOXICACIONES, SINDROMES TOXICOS, TOXICOS VOLATILES, MINERALES. 1. DATOS INFORMATIVOS:
Carrera: Bioquímica y Farmacia.
Alumna: Viviana Elizabeth Bravo Suqui
Curso: quinto año
Paralelo: ``A``
Grupo: # 5
Fecha de elaboración de la práctica: Martes 30 de Agosto del 2016
Fecha de entrega de la práctica: Martes 06 de Septiembre del 2016
Docente: Dr. Carlos García MSc
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TITULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACION POR COBRE Animal de Experimentación: Rata wistar Vía de Administración: Intraperitoneal. Volumen administrado: 10 ml TIEMPOS: Inicio de la práctica: 8:30 am Hora de disección: 9:00AM Hora Inicio de Destilado: 9:30 am Hora de finalización de Destilado:10:00am Hora finalización de la práctica: 10:30 am ``Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis’’
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Objetivo: 1. Observar la reacción que presenta el animal de experimentación ante la Intoxicación por Cobre. 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el toxico y adquirir la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de identificación. Sintomatología Vómito, Diarrea, Cefalea, Nausea, Somnolencia FUNDAMENTO: Elemento químico de número atómico 29, masa atómica 63,54 y símbolo Cu ; es un metal de color pardo rojizo, brillante, dúctil, muy maleable, resistente a la corrosión y buen conductor de la electricidad y el calor; es el metal de más usos y se utiliza para la fabricación de cables, líneas de alta tensión, maquinaria eléctrica y en aleaciones, siendo las dos más importantes el latón, una aleación con cinc, y el bronce, una aleación con estaño.
INSTRUCCIONES: Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS Y SUSTANCIAS:
MATERIALES
EQUIPOS
VIDRIO: Vasos de precipitación Pipetas Erlenmeyer Tubos de ensayo Probeta Perlas de vidrio Agitador Embudo OTROS Guantes Mascarilla Gorro Mandil
SUSTANCIAS
Aparato de destilación Balanza Baño maría Campana
Agua destilada Clorato potasio KClO3 Solución Cobre Ferrocianuro potasio Amoniaco Cupron Yoduro potasio Cianuros alcalinos Hidróxido amonio Hidróxido sodio Sulfuro Hidrógeno
``Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis’’
MUESTRA Destilado de del de Vísceras animal de de experimentación. de
de
de de de Página 2
@ 1.
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Aguja Yoduro de potasio hipodérmica 10 mL Cronómetro Estuche de disección Panema Agitador Fosforo Pinzas Cocineta Espátula Gradilla PROCEDIMIENTO: Inmediatamente al ingreso de los estudiantes al Laboratorio de Toxicología se debe equipar adecuadamente con mandil largo para Laboratorio limpio y sin manchas, gorro desechable, mascarillas desechables, guantes desechables y zapatones. Todo esto se realiza siguiendo las normas del Laboratorio para evitar posibles contaminaciones y contribuir con el orden. Desinfectar el área de trabajo para realizar la práctica de Toxicología, siempre se debe tener limpio el mesón de trabajo y tener listo a disposición los respectivos materiales que se utilizaran en la práctica correspondiente en el Laboratorio de Toxicología. Se procede a la administración del tóxico que es el Cobre, la dosis es diez mililitros al animal en experimentación que es la rata wistar. Se prepara la solución tóxica de Cobre, con 10 mililitros de la solución Cobre (CuSO4) con una jeringuilla de 10cc y administrarle a la rata wistar por vía intraperitoneal. Anotar la hora de administración. Colocar la rata wistar en el panema y observar su sintomatología tomando en cuenta el tiempo hasta su deceso. Muerto el animal colocarlo en la tabla de disección se lo amarra con la ayuda de una piola. Realizar la disección con un bisturí, pero antes se debe afeitar el área. Colocar las vísceras y líquido visceral en un vaso de precipitación, triturarlas lo más finamente posible. Agregar las 50 perlas de vidrio y añadir 2 gramos de KClO3 y 25 ml de Ácido Clorhídrico concentrado. Para disolver el ácido, disolver en 20 ml de agua. Mezclar bien y llevar a baño maría por 30 minutos. con agitación regular. A los 5 minutos que se cumpla con el tiempo establecido añadir 2 gramos más de KClO3. Una vez finalizado el baño María, dejar enfriar, filtrar y con el filtrado realizar las reacciones de reconocimiento. Al finalizar la práctica, se procede al levantamiento de todos los medios biológicos y materiales de Laboratorio.
``Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis’’
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Se desinfecta nuevamente el área de trabajo, se desechan los materiales y que queden en su lugar y en orden luego desinfectarse las manos. REACCIONES: El líquido proveniente de la destrucción de la materia orgánica, es tratado con amoniaco para disminuir la acidez y luego se realizan las reacciones de identificación que a continuación se detallan. 1. Con el Ferrocianuro de Potasio: En un medio acidificado con ácido acético, el cobre reacciona dando un precipitado rojo oscuro de ferrocianuro cúprico, insoluble en ácidos diluidos, soluble en amoniaco dando color azul. K4Fe(CN)6 + 2Cu(NO3) --- > Cu2Fe(CN)6 + KNO3 2. Con el Amoniaco: La solución muestra tratada con amoniaco, forma primero un precipitado verde claro pulverulento que al agregarle un exceso de reactivo se disuelve fácilmente dando un hermoso color azul por formación de un compuesto cupro-amónico. Cu(NO3)2 + 4NH3 ---- > Cu(NH3)4 . (NO3)2 3. Con el Cuprón: En solución alcoholica al 1 % al que se le adiciona gotas de amoniaco, las sales de cobre reaccionan produciendo un precipitado verde insoluble en agua, amoniaco diluido, alcohol, ácido acético, soluble en ácidos diluidos y poco solubles en amoniaco concentrado. C6H5-C=NOH C6H5-C=N-O C6H5-CHOH + Cu(NO3)2 ---- > C6H5-C-N-O---- > Cu + 2HNO3 4. Con el Yoduro de Potasio: Adicionando a la solución muestra gota a gota, primeramente se forma un precipitado blando que luego se transforma a pardo-verdoso o amarillo. Cu(NO3)2 + IK + I3 5. Con los cianuros alcalinos: A una pequeña cantidad de muestra se agregan unos pocos cristales de cianuro de sodio formando un precipitado verde de cianuro de cobre, a este precipitado le agregamos exceso de cianuro de sodio y observamos que se disuelve por formación de un complejo de color verde-café. (NO3)Cu + 2CNNa ---- > (CN)2Cu + NO3- + Na+ (NO3)Cu + 3CNNa ---- > [Cu(CN)3]= + 3Na+ 6. Con el Hidróxido de Amonio: A la solución muestra, agregarle algunas gotas de NH4OH, con lo cual en caso positivo se forma un precipitado color azul claro de solución NO3(OH)Cu. Este precipitado es soluble en exceso de reactivo, produciendo solución color azul intenso que corresponde al complejo [Cu(NH3)4]++. (NO3)2Cu + NH3 ---- > Cu(OH)NO3 (NO3)2Cu +3 NH3 ---- > 2[Cu(NH3)4+++ NO3H + H2O
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7. Con el Hidróxido de Sodio: A 1ml de solución muestra, agregamos algunas gotas de de NaOH, con lo cual en caso de ser positivo se debe formar un precipitado color azul pegajoso por formación de Cu(OH)2. Este precipitado es soluble en ácidos minerales y en álcalis concentrados. Cu++ + 2OH --- > Cu(OH)2 8. Con el SH2: A la solución muestra, hacerle pasar una buena corriente de SH2, con lo cual en caso de ser positivo se forma un precipitado color negro este precipitado es insoluble en exceso de reactivo, en KOH 6M, en ácidos minerales diluidos y fríos . (NO3)2Cu + SH2 ---- > SCu+ 2NO3H 9. Con el IK: A una pequeña porción de solución muestra agregarle gota a gota de solución de IK, con lo cual en caso de ser positivo se forma inicialmente un precipitado color blanco que luego se transforma en pardo verdoso o por formaciones de iones tri yoduros, el mismo que se puede volar con Tio sulfato de sodio. (NO3)Cu + Tri yoduros @ GRÁFICOS:
1.
Escogemos el animal de experimentación.
4. Con ayuda de un bisturí sacamos las vísceras.
2. Aplicamos el toxico.
5. Trituramos las vísceras para llevarlas a destilación.
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3. Observamos los síntomas que presenta la Rata wistar hasta su muerte.
6. Después de la destilación obtenemos la solución madre que la que haremos reacciones de identificación. Página 5
REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN:
1. MATERIALE MATERIALES OTROS VIDRIO Mandil Tubo de ensayo Gorro Mascarilla Guantes Zapatones Agitador Espátula Papel para pesar
SUSTANCIAS ferrocianuro de potasio Muestra
2. PROCEDIMIENTO: Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse. A la muestra se la acidifica con ácido acético, luego se agrega unas gotas de ferrocianuro de potasio, si da coloración azul es positivo. 3. GRAFICOS Visceras
Tomar la muestra
Moler la muestra
Se filtra la muestra
acidifica con acido acetico
Se agrega ferrocianuro de potasio unas gotas.
Camarón Agregar gotas de ferrocianuro de potasio a la muestra de camarón
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4. RESULTADO Vísceras de pollo ( - ) Vísceras de camarón ( - )
REACCION CON SH2 1. MATERIALES MATERIALES OTROS VIDRIO Mandil Vaso de Gorro precipitación Mascarilla Mortero Guantes Tubos de ensayo Zapatones Agitador Espátula Papel para pesar
SUSTANCIAS
SH2 Muestra
2. PROCEDIMIENTO Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse La sal muestra tratada con NH3 forma primero un ↓ verde claro pulverulento que al agregarle un exceso de reactivo se disuelve dando un color azul. 3. GRAFICOS Víscera de camarón Triturar la muestra
1.A la muestra acidificada filtrarla
2. con la pirita tratarla por el calentamiento
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3. exceso de reactivo agregarle .
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Vísceras de Pollo
1. con la pirita tratarla por el calentamiento
2. observar el cambio de color
4. RESULTADO Vísceras de pollo ( - ) Vísceras de camarón ( - )
REACCION CON NaOH 1. MATERIALES MATERIALES VIDRIO Tubo de ensayo Pipeta
OTROS Mandil Gorro Mascarilla Guantes Zapatones
SUSTANCIAS NaOH Muestra
2. PROCEDIMIENTO: Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse A la muestra agregar unas gotas de NaOH para (+) color azul pegajoso. 3. GRAFICOS Camaròn
1. Moler la muestra .
2. Agregar unas gotas de NaOH
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3. Reaccion con el NaOH
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Vísceras de pollo
1. Obtener el extracto de las visceras de pollo
2. Agregar unas gotas de NaOH
3. Observar reaccion
5. RESULTADO Vísceras de pollo ( - ) Vísceras de camarón ( - )
REACCION CON IK 1. MATERIALES MATERIALES OTROS VIDRIO Mandil Tubo de ensayo Gorro Pipeta Mascarilla Guantes Zapatones
SUSTANCIAS IK Muestra
2. PROCEDIMIENTO: Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse Adicionar a la solución muestra gota a gota, primeramente, se forma un precipitado blanco que luego se transformó a pardo- verdoso o amarillo. 3. GRAFICOS Camaròn
1. Moler la muestra .
2. Filtrar la muestra
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3. Agregarle gotas de Ik
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Vísceras de pollo
1. Obtener el extracto de las visceras de pollo
2. Agregar unas gotas de IK
4. REACCION: Cu(NO3)2 + IK + I35. RESULTADO VISCERAS DE POLLO (+) VISCERAS DE CAMARON (+)
VISCERAS DE CAMARON 2(+)
REACCION CON NH4OH 1. MATERIALES MATERIALES VIDRIO Vaso de precipitación Mortero Tubos de ensayo
SUSTANCIAS
OTROS Mandil Gorro Mascarilla Guantes Zapatones Agitador
NH4OH Muestra
2. PROCEDIMIENTO: Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse A la solución muestra agregarle algunas gotas de NH4OH en caso de ser positivo se forma un precipitado color azul claro de solución NO3(OH)Cu. 3. GRAFICOS
1. Moler la muestra
2. Acidificar muestra
la
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3. Filtrar muestra .
la
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4. agregar unas gotas de NH4OH
Visceras de pollo
se tiene la muestra de las visceras de pollo
agregar unas gotas de NH4OH
4. RESULTADOS VISCERAS DE POLLO: (+) VISCERAS DE CAMARON (+)
REACCION CON YODURO DE POTASIO 1. MATERIALES MATERIALES VIDRIO Vaso de precipitación Mortero Tubos de ensayo
OTROS Mandil Gorro Mascarilla Guantes Zapatones
SUSTANCIAS YODURO DE POTASIO
Muestra
2. PROCEDIMIENTO: Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse
``Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis’’
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A la solución madre adicionar 3 gotas de yoduro de potasio previamente diluido, formación de precipitado que en reacción positiva seria pardo verdoso o amarillento. 3. GRAFICOS
Moler la muestra
Agregar yoduro de potasio a las muestras
4. RESULTADO Vísceras de pollo (+) Vísceras de camarón (+)
CUPRON ↓VERDE
Vísceras de pollo (+) Vísceras de camarón (-) CIANURO DE SODIO
Vísceras de pollo (+) Vísceras de camarón (-) CONCLUSIONES. Al término de esta práctica podemos concluir que el veneno utilizado (cobre) es muy tóxico debido a las manifestaciones como daño del SNC, daño sistema inmune, desordenes psicológicos que se presentaron en el animal, el deceso fue inmediato y mediante las reacciones para el reconocimiento de éste podemos concluir que si hubo presencia de cobre. RECOMENDACIONES Asegurar de tener todos los reactivos de trabajo. Usar la protección adecuada como: bata, guantes, mascarilla, etc. Colocar ventilación por el formaldehido liberado ``Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis’’
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CUESTIONARIO 1. ¿CUÁLES SON LOS PRINCIPALES ENFERMEDADES POR LA INTOXICACIÓN POR COBRE? La anemia hemolítica, la enfermedad de Wilson se debe por la acumulación progresiva de cobre en hematíes, riñón, hígado y cerebro de carácter hereditario autosómico recesivo por lo que se produce en hermanos de ambos sexos pero no recibe directamente de los padres ni se cede a los hijos. 2. ¿DÓNDE PODEMOS ENCONTRAR EL COBRE COMO COMPUESTO TÓXICO PARA LA SALUD HUMANA? El cobre el agua potable causa trastornos en la salud humana, la aparición de los síntomas es cuestión de minutos a horas (diarrea: uno a dos días) después de la ingestión de agua de cobre 3. ¿NOMBRE CIERTOS TRATAMIENTOS BIOLÓGICOS INTOXICACIÓN POR COBRE EN SERES HUMANOS?
CONTRA
LA
Tratamiento Biológico: la prescripción mediante fitoterápicos debe ser inmediata como el B-4. BD-15 para restrablecer el hígado. Una dieta rica en vitaminas y un tratamiento único como la D-PENICILINA, fijadora del cobre al suero y por tanto eliminación de su circulación.
GLOSARIO Autosómico dominante: El término autosómico dominante describe a uno de los patrones de herencia clásicos o mendelianos y se caracteriza por presentar el fenómeno de dominancia genética para un determinado alelo de un gen cuyo locus se encuentra ubicado en alguno de los autosomas o cromosomas no determinantes del sexo. Caracteres hereditario: Característica morfológica, estructural o fisiológica presente en un ser vivo y transmisible a la descendencia. ANEXOS
Desinfectar el área de trabajo
``Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis’’
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Apuntes en la pizarra. BIBLIOGRAFÍA 1.Fundación Europea de Medicinas Alternativas. Enfermedad de Wilson por la toxicidad del cobre. (En línea) 04-09-2016 disponible en: www.femalt.com 2.DURÁN J., COLLÍ-QUINTAL J. Intoxicación Aguda por Plaguicidas. Vol.42. Revista Chilena Scielo. Servicio de Medicina Interna, Hospital General O’Horán, Mérida, Yucatán, México. 2000 [Fecha de consulta: 4 de septiembre del 2016]. Disponible en: http://www.scielosp.org/pdf/spm/v42n1/2400.pdf?origin=publication_detail 3.SI ANALYTICS. Ficha de datos de seguridad [En línea]. 2011. [Fecha de consulta: 4 de septiembre del 2016]. Disponible en: http://www.sianalytics.com/fileadmin/upload//SDBs/ISELoesungen/Eng/ES%20Cu_120190_ISE%20solution_Spanish-PDF.pdf
MACHALA 6 DE SEPTIEMBRE DEL 2016
________________ FIRMA BRAVO SUQUI VIVIANA ELIZABETH :
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